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倒置显微镜对焦图像不清晰

提供来源:上海百贺 日期:2018年07月03日
 
朋友们在使用倒置显微镜高倍观察时,有没有遇到这样的情况:怎么对焦图像都不清晰。
如果有,看看你的高倍物镜是否是带校正环的物镜?
何为带校正环的物镜,如图:
首先,我们来说说校正环物镜的作用:倒置显微镜上,经常会使用诸如培养皿、多孔板等各种不同类型的耗材,底部厚薄不一,这会对光线穿行造成一定的改变。此时,必须使用带有校正环功能的物镜,它的中部装有环装的调节环,当转动调节环时,可调节物镜内透镜组之间的距离,从而校正由盖玻片(培养皿)厚度不标准(常规培养皿为1.2mm,盖玻片为0.17mm)引起的像差。正确使用方法为:校正椎魑曜贾?.2mm,对样本对焦。校正环往右调半格,再对样本对焦,如果图像效果变好,则再往右调再对焦,反之往左调。
 
让我们再来说说校正环错误使用的影响:经常,我们能接到用户来电说高倍物镜看不清楚,我们通常会让他去看一看校正环对应位置对不对。因为从很多实际使用情况看来,由于使用习惯的问题(切换物镜时不是旋转物镜转盘,而是直接抓着物镜切换),校正环会在极限位置(校正环位置已经超过了2),如图:
切换物镜时应通过物镜转盘,养成良好的显微镜使用习惯
 
我们来看看效果图比较:
 
校正环在极限位置
 
校正环在1.2位置
最后,让我们来说说此物镜的另一秘密作用:我们之前说到过,正置显微镜用于切片观察,倒置显微镜用于培养细胞观察。但是如果实验室没有正置显微镜,又要观察切片时,很多人会迁就下在倒置上观察。如何在倒置显微镜上得到好的荧光图像呢?这里我们也能充分利用下带校正环的物镜:把切片倒扣,盖玻片朝下,校正环调到0.17。
 
校正环0.17位置
下面两张图是在相机参数相同情况下拍摄,左边的是切片正放,校正环1.2,右边的切片倒扣,校正环0.17,我们可以看到,倒扣的清晰度及荧光亮度都更好。
 
 校正环1.2位置(切片正放)↑
 
校正环0.17位置(切片倒扣)↑
 
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